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  • 蛋白酶K(核酸纯化与电泳)
  • 型号:FS0351
  • 报价:200
  • 地区:上海市
  • 0
  • Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K(核酸纯化与电泳) CAS : 39450-01-6 分子量 : 28.9 kDa 是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,生物实验室常用酶之一。该酶在较广的pH范围内(pH4-12.5)均有活性。用于mRNA和DNA与蛋白质的分离。
  • 025-58690567
产品详细介绍

Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

产品信息

货号

名称

规格

价格(元)

FS0351-100MG     

Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K     

100mg    

200.00

FS0351-500MG

Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K

500mg

800.00

FS0351-1G

Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K

1g

1200.00

产品描述

蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以,蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合ca2+。
蛋白酶K,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。
推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。

[注]!蛋白酶K配制标准:20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

产品属性 

CAS : 39450-01-6 

分子量 : 28.9 kDa 

英文名称 : Proteinase K 

外观(性状) : 冻干粉

储存条件 : -20℃,避免反复冻融,有效保证12月。

活力:40mAnsom u/mg

性状:粉末,是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,来源于白色念球菌(. Tritirachium album. ),具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活,反而增强和稳定酶活性,并在较广的PH范围内(PH4-12.5)均有活性。在组织或细胞核酸分离时,使核酸酶(RNA和DNA)以及反应中其他酶失活。

产品应用

用途:生化研究。广谱蛋白酶,95C加热10分钟,则完全失活。可替代DEPC处理RNA抽提用的离心管和 头,实现灭活RNase A的目的,也用于处理RNase-Free的水。充分降解组织或细胞中蛋白质分子特别是核酸,以达到释放和萃取高质量核酸的辅助试剂。用于质粒或基因组DNA、RNA的分离以及蛋白多肽印迹实验。

蛋白酶k的作用
值得注意的是,蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果.

孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。

注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。

蛋白酶K(核酸纯化与电泳) 蛋白酶K(核酸纯化与电泳) 

 

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